ศึกษาประสิทธิภาพในการทำงานของเอสไออาร์เอ็นเอ ในการกำจัดเชื้อไวรัสเฮชไอวีโดยใช้ระบบจีเอฟพีอินทรอนพลาสมิด
- ชื่อนักเรียนผู้จัดทำโครงงานวิทยาศาสตร์
อัครวิทย์ ธรรมธนารักษ์, เตชินท์ ปัญญาสกุลวงศ์, ณัฐณภัทร โห่ศิริ
- อาจารย์ที่ปรึกษาโครงงานวิทยาศาสตร์
สถาพร วรรณธนวิจารณ์, ศุภฤกษ์ บวรภิญโญ
- โรงเรียนที่กำกับดูแลโครงงานวิทยาศาสตร์
- ปีที่จัดทำโครงงานวิทยาศาสตร์
บทคัดย่อโครงงานวิทยาศาสตร์
ระบบ siRNA เป็นระบบที่มีความสามารถในการยับยั้ง RNA จึงสามารถนำไปใช้ในการรักษาโรคที่เกิดจาก Virus โดยเฉพาะ ไวรัสเอชไอวี (HIV virus) ได้ แต่ในปัจจุบันกระบวนการในการทดสอบประสิทธิภาพของ siRNAนั้น มีความซับซ้อนและยุ่งยาก ดังนั้นทางกลุ่มของข้าพเจ้าจึงได้ริเริ่มโครงงานสร้างระบบจีเอฟพีอินทรอนพลาสมิด (GFP intron plasmid system)เพื่อใช้ในการหาประสิทธิภาพของ siRNA และใช้ในการคัดเลือก siRNA ที่มีประสิทธิภาพมากที่สุด โดยระบบนี้สามารถทำได้โดยการสร้าง จีเอฟพี อินทรอน พลาสมิด จากนั้นทำการตัดต่อยีนGAG ของHIV-1 ในส่วนของบริเวณ P6 ซึ่งเป็นส่วนที่มีอัตราการเกิดมิวเทชั่น(mutation rate)น้อยที่สุดจึงเปรียบเสมือนตัวแทนของไวรัสเอชไอวี ลงในส่วนของอินทรอน (intron) บริเวณที่ปลอดภัย(safe zone) ขั้นตอนต่อไปคือการออกแบบ siRNA โดยมีเป้าหมายเป็นจีโนมของไวรัสเอชไอวีในส่วนของ P6 จากนั้นแบ่งการทดลองออกเป็นสองส่วน โดยส่วนแรกคือการนำ GFP Intron plasmid เข้าสู่เซลล์โดยกระบวนการ Transient Transfection และส่วนที่สองนำ siRNA plasmid และ GFP Intron Plasmid เข้าสู่เซลล์โดยกระบวนการ Co-transfection จากนั้นเปรียบเทียบความแตกต่างระหว่างปริมาณ โปรตีนจีเอฟพี (GFP protein) ที่ตรวจพบจากการทดลองทั้งสองส่วน จากนั้นออกแบบส่วนของ siRNA ใน siRNA plasmid ใหม่โดยยังคงเลือกส่วนที่เป็นบริเวณอนุรักษ์ (Conservative region) ของ P6 GAG HIV-1 แล้วนำ siRNA plasmid ที่ออกแบบใหม่ และ GFP Intron Plasmid เข้าสู่เซลล์ โดยกระบวนการ Co-transfection จากนั้นวัดปริมาณโปรตีน GFP ที่เกิดขึ้นแล้ว นำผลการทดลองที่ได้มาปรียบเทียบและหา siRNA ที่มีประสิทธิภาพดีที่สุด ซึ่งทางกลุ่มของข้าพเจ้ามีความคาดหวังว่าระบบนี้สามารถนำไปต่อยอดในการพัฒนารักษาโรคที่เกิดจากเชื้อไวรัสได้อย่างมีประสิทธิภาพและสามารถนำระบบนี้ไปใช้ในการทดลอบประสิทธิภาพของระบบ gene silencing อื่นๆได้