PmRab7 in Yeast: Protein interaction and Production

ชื่อผู้จัดทำโครงงานวิทยาศาสตร์
  • ณัฐพงษ์ จูพัฒนกุล

อาจารย์ที่ปรึกษาโครงงานวิทยาศาสตร์
  • วันเพ็ญ วรรณปะโพธิ์

  • Timothy William Flegel

  • กัลยาณ์ ศรีธัญญลักษณา

สถาบันการศึกษาที่กำกับดูแลโครงงานวิทยาศาสตร์

คณะวิทยาศาสตร์ มหาวิทยาลัยมหิดล

ระดับการศึกษา

โครงงานในระดับการศึกษาปริญญาโทขึ้นไป

หมวดวิชา

โครงงานในสาขาวิชาชีววิทยา

วันที่จัดทำโครงงานวิทยาศาสตร์

01 มกราคม 2541

บทคัดย่อโครงงานวิทยาศาสตร์

PmRab7 เป็นโปรตีนที่สามารถจับกับไวรัสดวงขาวในกุ้งได้ การฉีดรีคอมบิแนนท์PmRab7 เข้าไปในกุ้งพบว่าสามารถป้องกันโรคดวงขาวได้ จึงมีความเป็นไปได้ในการนำเอารีคอมบิแนนท์PmRab7มาใช้ในระดับอุตสาหกรรม การจะนำรีคอมบิแนนท์PmRab7มาใช้ในระดับอุตสาหกรรมจำเป็นต้องมีการปรับปรุงกระบวนการผลิตเพื่อให้สามารถนำมาใช้ในบ่อเลี้ยงกุ้งจริงได้ ผลการทดลองที่ผ่านมาทำการผลิตรีคอมบิแนนท์PmRab7ในระบบของแบคทีเรีย ทำให้ได้ปริมาณน้อย (10 15 mg/L) ข้อเสียอีกอย่างหนึ่งของโปรตีนที่ผลิตในระบบของแบคทีเรีย คือ โปรตีนที่ได้จะไม่มี post translational modification โครงงานวิจัยนี้จึงมีวัตถุประสงค์ที่จะผลิตรีคอมบิแนนท์PmRab7ในระบบยีสต์ Pichia pastoris ซึ่งนอกจากจะได้ผลผลิตมากและโปรตีนที่ได้มี post translational modification ที่เหมาะสมแล้ว ผนังเซลล์ของยีสต์ก็มีส่วนประกอบเป็น β 1,3 glucan ที่มีรายงานว่าสามารถกระตุ้นภูมิคุ้มกันของกุ้งให้ดีขึ้นร่วมอยู่ด้วย ดังนั้นการให้ยีสต์ที่สร้างรีคอบิแนท์PmRab7ผสมอาหารให้กุ้งกินนอกจากจะสามารถป้องกันโรคดวงขาวแล้วยังสามารถเสริมภูมิคุ้มกันของกุ้งได้ด้วย PmRab7 is a WSSV binding protein found in shrimp. Previous studies indicated that recombinant PmRab7 could block white spot disease in shrimp. These results suggest the potential use of rPmRab7 for protection of WSSV in shrimp aquaculture management. In order to develop the recombinant protein to be use in shrimp industry, the production process has to be improved. In laboratory scale, rPmRab7 was produced in bacterial expression system, which resulted in low amount of protein production (10 15 mg/L). Recombinant protein expressed in bacterial system has no post translational modification process, which is essential for protein function in eukaryotic organism. This study aims to produce these proteins in a yeast expression system (Pichia pastoris). Since yeast is eukaryote, the expressed protein will have proper post translational modification. β 1,3 glucan, a major cell wall component of yeast has been reported to act as immunostimulant in shrimp. Feeding recombinant proteins produced in yeast to shrimp should contribute synergistic effect in protection of WSSV and improvement of shrimp health status.